飘香藤的组织培养繁殖方法

摘要

本发明涉及飘香藤的组织培养繁殖方法，首先以在生长季节选取生长旺盛飘香藤(Dipladenia sanderi)的幼嫩顶芽为外植体，经消毒后接种到每升含有6-苄基嘌呤0.1～0.5mg，吲哚丁酸0.01～0.05mg的MS培养基中至形成不定芽，然后将诱导出的不定芽切割后再继代培养于与上述相同的培养基中进行不定芽的增殖，当芽高约2～3cm时，切下接种到每升含有萘乙酸0.5～1.0mg和活性炭0.05～0.1g的B5培养基中至正常生根，最后当生根试管苗长至3～4cm时，在自然光照下炼苗后移栽。本发明方法能快速大量繁殖试管种苗，生根率可达85％以上，成活率可达85％以上，而且种苗无病虫害生长健壮，品质好、抗性强、生长快，便于生产管理和降低生产成本。

主权项

飘香藤的组织培养繁殖方法，其特征包括以下的步骤：(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导：在生长季节选取生长旺盛飘香藤(Dipladeniasanderi)的幼嫩顶芽为外植体，用水冲洗干净后先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.1％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后切至剩下茎尖和带节茎段，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升含有6 苄基嘌呤0.1～0.5mg，吲哚丁酸0.01～0.05mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.8～6.0；(2)不定芽的继代增殖：将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于与步骤(1)相同的培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天进行不定芽的增殖；(3)生根培养：当步骤(2)芽高2～3cm时，切下接种到生根培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天培养至正常生根，所述的培养基每升中含有萘乙酸0.5～1.0mg，活性炭0.05～0.1g，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为B5，pH5.8～6.0；(4)试管苗移栽：步骤(3)的生根试管苗长至3～4cm时，在自然光照下炼苗7～10天，洗净根部培养基，移栽到蛭石和泥炭土等量混合而成的基质中，喷雾保湿85％～95％、遮荫75％～85％、保温20～30℃培养。