一种用高速逆流色谱从海参中分离制备脑苷脂的方法

摘要

本发明公开了一种用高速逆流色谱从海参中分离制备脑苷脂的方法，其特征在于：向海参干粉中加入氯仿和甲醇混合液，室温浸泡，滤液浓缩后得到脑苷脂粗提物；将石油醚、甲醇和水混合，对形成的固定相和流动相分别进行超声脱气；所得粗提物采用该混合溶剂溶解后过滤制得样品溶液；先将固定相泵入高速逆流色谱仪的色谱柱中，然后调节主机转速和流动相流速，泵入流动相，待两相平衡后，经进样阀将样品溶液泵入色谱柱中，再继续泵入流动相，分步收集，并用薄层色谱法检测，合并目标物，浓缩，冻干，得到脑苷脂。本发明制备工艺简单、操作简便、纯化效率高、分离时间短、稳定性好，适用于多种海参样品中脑苷脂的分离制备，适合工业化生产。

主权项

一种用高速逆流色谱从海参中分离制备脑苷脂的方法，其特征在于：(1)向海参干粉中加入氯仿甲醇混合液，室温下浸泡过夜，过滤，按此步骤重复操作3～8次，合并各次所得滤液，减压浓缩后得脑苷脂粗提物；(2)将石油醚、甲醇和水混合，振荡摇匀，静置分层后分离，取上相作为固定相，下相作为流动相，对两相分别进行超声脱气10～30分钟；(3)将上述脑苷脂粗提物溶解于等体积的固定相和流动相的混合溶液中，过滤得样品溶液；(4)将上述配制好的固定相泵入高速逆流色谱仪的色谱柱中；然后开启高速逆流色谱仪，调节主机转速和流动相流速，将流动相也泵入上述色谱柱内；待两相在色谱柱内平衡后，使上述样品溶液经进样阀进入上述色谱柱；进样完毕后继续泵入流动相，分步收集分离物，并用薄层色谱法检测，合并目标物，浓缩，冻干，得到脑苷脂。