一种人染色体P16基因探针的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种人染色体P16基因探针的制备方法，还涉及利用人染色体P16基因探针制备一种人染色体P16基因检测试剂盒，应用本发明的人染色体P16基因探针及相应的试剂盒可以对人染色体P16基因异常进行准确、快速的检测。

主权项

一种人染色体P16基因探针的制备方法，其特征在于制备步骤包括：(1)克隆筛选：P16基因位于人染色体9p21区段，挑选包含有该基因的克隆；(2)克隆培养和鉴定：购买克隆，取适量克隆菌液添加到500ml的TB培养液(氯霉素抗性)中，37℃摇床中摇菌培养24～48小时；使用STS引物对进行克隆鉴定；(3)P16基因探针制备：对鉴定阳性的菌液，进行质粒DNA的提取；通过适当稀释质粒DNA，对质粒DNA定量；然后，通过缺口平移方法对质粒DNA进行荧光标记；对标记产物进行乙醇沉淀和浓缩；获得P16探针，避光、-20℃储存；(4)P16基因探针验证：使用人类正常分裂中期淋巴细胞滴片进行探针验证。