一种生物拆分制备阿巴卡韦手性中间体的方法

摘要

本发明公开了一种生物拆分制备阿巴卡韦手性中间体的方法，具体涉及采用Pseudomonas cepacia DSM9959固定化细胞在生物拆分制备阿巴卡韦手性中间体中的应用。该固定化细胞的用量为5-50g/100mL反应体系，在10-500g/L外消旋2-氮杂双环-[2，2，1]-庚烷-5-烯-3-酮底物浓度，50mM pH7.5磷酸钾缓冲液，25℃200rpm水浴摇床的条件下，转化24-48小时，转化率最高可达48.5％，e.e值大于99.5％。反应液过滤后得到的残余固定化细胞，可在下批反应中重复利用五次以上，转化率仍大于35％，e.e.值大于99.5％。与游离细胞转化相比，达到其50％以上的活性。本工艺路线催化剂制备简易，可重复利用五次以上；反应条件温和，无需进行底物保护；反应步骤精简；产物的对映体过量值达99.5％以上，因此具有较好的经济性和技术可行性。

主权项

一种生物拆分制备阿巴卡韦手性中间体的方法，其特征在于包含以下步骤：a.将1-5g卡拉胶加入20-200mL生理盐水溶液中，煮沸溶解后冷却至45℃左右；与20-200mL，10-50％的P.cepacia菌悬液(生理盐水)混合，倒入浅盘硬化；加入0.1-0.5M的KCl溶液，静置1-10小时，生理盐水充分冲洗后切块，存于4℃环境中；b.底物溶液为含有10-500g/L外消旋2-氮杂双环-[2，2，1]-庚烷-5-烯-3-酮的50mM pH7.5磷酸钾缓冲液；于200mL底物溶液中加入10-100g步骤a所述的固定化细胞，在25℃200rpm水浴摇床中转化24-48小时；反应结束后过滤，用50mM pH7.5磷酸钾缓冲液淋洗固定化细胞，待下批反应重复利用。