| 摘要 |
1. Способ кариологической оценки безопасности культур мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток заключается в подготовке клеточных культур, подготовке микропрепаратов, методике окрашивания микропрепаратов, кариотипирования и оценки анеуплоидии в интерфазных ядрах ! 2. Способ кариологической оценки безопасности культур мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток по п.1, характеризующийся тем, что мононуклеарные клетки, выделенные из костного мозга или жировой ткани, высаживают в культуральные вентилируемые флаконы, содержащие ростовую среду DMEM с 10-20% эмбриональной телячьей сыворотки, и через 24-48 ч неприкрепленные клетки удаляют со сменой среды, в дальнейшем культуры инкубируют до достижения 75-90%-ной конфлюентности, культивирование проводят при температуре 37°С в условиях абсолютной влажности и 5% СО2, начиная с 3-го пассажа, культуры МСК имеют мономорфный вид и состоят из клеток веретенообразной формы. ! 3. Способ кариологической оценки безопасности культур мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток по п.1, характеризующийся тем, что фиксацию МСК для цитогенетического анализа проводят на 2-3-й день после последнего пассажа, при этом плотность культуры в день фиксации не должна превышать значения 60% конфлюентности. ! 4. Способ кариологической оценки безопасности культур мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток по п.1, характеризующийся тем, что на 1-м этапе получают митотические клетки, которые используются для кариотипического анализа с помощью орбитального шейкера (скорость 100 об/мин, 30 мин), после чего проводят фиксацию. ! 5. Способ кариологической оценки безопасности куль� |
