发明名称 快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法
摘要 一种快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法,主要步骤如下:1)将野生型菌株在含有乙醇的液体培养基中连续培养,定向进化嗜热厌氧产乙醇微生物的乙醇耐受性;2)对耐受乙醇的菌株进行甲基磺酸乙酯诱变,将诱变后的菌液涂布到含有乙醇的固体培养基上;3)待形成单菌落后,选择菌落半径大的单菌落滴加2,3,5-三苯基氯化四氮唑显色液,取显色颜色深的单斑到含有高底物浓度的CaCO3复筛平板上进行复筛;4)选择菌落半径大但透明圈半径小的菌落,滴加pH指示剂排除假阳性;5)发酵后用气相色谱或乙醇定量试剂盒测定乙醇浓度,选择乙醇产量高的菌株在非选择条件下培养至少20代,仍能保持高乙醇产量的菌株即为目的菌株。
申请公布号 CN101845434A 申请公布日期 2010.09.29
申请号 CN201010149123.3 申请日期 2010.04.19
申请人 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 发明人 籍月彤;宋厚辉;徐健
分类号 C12N15/01(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N;C12R1/145(2006.01)N 主分类号 C12N15/01(2006.01)I
代理机构 中科专利商标代理有限责任公司 11021 代理人 周长兴
主权项 一种快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法,主要步骤如下:1)将野生型菌株在含有乙醇的液体培养基中连续培养,定向进化嗜热厌氧产乙醇微生物的乙醇耐受性;2)对耐受乙醇的菌株进行甲基磺酸乙酯诱变,将诱变后的菌液涂布到含有乙醇的固体培养基上;3)待形成单菌落后,选择菌落半径大的单菌落滴加2,3,5-三苯基氯化四氮唑显色液,取显色颜色深的单斑到含有高底物浓度的CaCO3复筛平板上进行复筛;4)选择菌落半径大但透明圈半径小的菌落,滴加pH指示剂排除假阳性;5)发酵后用气相色谱或乙醇定量试剂盒测定乙醇浓度,选择乙醇产量高的菌株在非选择条件下培养至少20代,仍能保持高乙醇产量的菌株即为目的菌株。
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