ENSAYOS DE FRET A BASE DE COLORANTES LIPOFILOS PARA DETERMINAR LA ACTIVIDAD DE LA TOXINA CLOSTRIDIAL.

摘要

Una célula aislada que comprende: a)un sustrato de Toxina Clostridial asociado a membrana, comprendiendo dicho sustrato i)un primer miembro de un par de transferencia de energía de resonancia de fluorescencia (FRET); ii)una secuencia de reconocimiento de Toxina Clostridial que incluye un sitio de escisión de Toxina Clostridial; y iii)un dominio de dirección de membrana; b)un segundo miembro asociado a membrana de un par de FRET, en el que el segundo par del miembro de FRET es un colorante lipófilo; y c)un receptor que se une a una Toxina Clostridial; en el que la célula es capaz de intoxicación por Toxina Clostridial; en el que el par de FRET comprende un aceptor que tiene un espectro de absorbancia que se superpone con el espectro de emisión de un fluoróforo donante; y en el que en las condiciones apropiadas, la transferencia de energía de resonancia se muestra entre el aceptor y el fluoróforo donante.