用于改进的核酸扩增反应的嵌合引物

摘要

提供了用于核酸序列扩增的方法。本方法使用RNA/DNA嵌合寡核苷酸作为引物。所述引物具有沿其长度散在分布的RNA残基，且引物中没有两个核糖核苷酸是彼此相邻的。本方法可用于减少如引物二聚体等非特异性扩增产物。本发明还提供了包含用于实践本扩增方法的RNA/DNA嵌合寡核苷酸引物的试剂盒。

主权项

一种在DNA依赖性DNA聚合酶扩增反应中减少或消除人工产物和非特异性扩增产物形成的方法，所述方法包括：使用至少一个RNA/DNA嵌合寡核苷酸作为正向引物或者作为反向引物以及使用DNA依赖性DNA聚合酶和任选的一个或多个寡核苷酸探针进行核酸扩增反应；其中所述嵌合寡核苷酸包含至少一个核糖核苷酸；其中位于所述嵌合寡核苷酸的3’末端或位于所述嵌合寡核苷酸的3’末端的10个核苷酸以内的核糖核苷酸的数目将允许当所述引物和预期的靶序列形成双链体时的DNA合成的起始而不会阻止DNA的延伸，并且将阻碍从引物-引物二聚体或者引物-探针二聚体起始的DNA合成；和其中所述引物中没有两个核糖核苷酸彼此相邻。