一种小RNA的定量检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了可用于对小RNA进行表达分析的一种小RNA的定量检测方法和试剂盒，该方法通过bulge loop RT引物将小RNA反转录为cDNA，加入PCR正向引物和PCR通用反向引物进行定量PCR扩增。本发明所述的小RNA的定量检测方法和试剂盒具有灵敏度高，特异性好和试剂盒价廉等优点，且可用于批量检测。

主权项

一种小RNA的定量检测方法，其特征是，包括以下步骤：(1)bulge loop RT引物将小RNA反转录为cDNA，所述bulge loop RT引物具有40-60个核苷酸，从5’端至3‘端有分别为茎1部分，bulge部分，茎2部分，环部分，茎3部分及延伸部分；茎3部分与茎1和茎2部分互补配对，延伸部分能与小RNA互补配对；(2)加入PCR正向引物和PCR通用反向引物进行定量PCR扩增，正向PCR引物为具有20-40个核苷酸序列，从5’端至3‘端分别为延伸部分和小RNA相似部分；小RNA相似部分为小RNA的cDNA的互补序列的一部分，其长度与bulge loop RT引物延伸部分的长度之和要大于或等于小RNA的全长；PCR反向通用引物长度为具有20-40个核苷酸的序列。