主权项 |
一种发酵—酶解耦联脱除柑橘橘片囊衣的方法,其特征在于该方法按以下步骤进行:(1)柑橘橘片的准备:将柑橘剥皮、分瓣成橘片,备用;(2)果胶酶菌种种子液的准备:以黑曲霉(Aspergillus niger)菌株2214、黑曲霉(Aspergillus niger)菌株40273或葡枝根霉(Rhizopus stolonife)菌株40325中的任选一种为菌种,挑取少量菌种在20%马铃薯煮汁1000ml中加入蔗糖20克的马铃薯培养基中活化培养24~48小时,至每100ml发酵液中的细胞干重≥100mg时,作为菌种种子液备用;(3)橘片酶解脱囊衣:在整套发酵-酶解耦联循环工艺中,除首次的橘片酶解脱囊衣采用商品果胶酶外,其余均采用由步骤(5)制备而成的液体果胶酶,并与商品果胶酶同样先用水配制成≥5000酶活单位/毫升的果胶酶溶液后,用HCl调pH至3~5,再将该液与步骤(1)橘片按重量2~5∶1比例置容器中混合,在30~50℃下酶解30~100分钟成脱囊衣橘片后,捞起、用水洗净即成;(4)发酵液的准备:向步骤(3)酶解废水中按0.3~3g/L加入氮源(NH4) 2SO4或NH4Cl,用HCl调pH至3~5,经100~121℃灭菌,降至室温后成发酵液,备用;(5)加菌种发酵制备果胶酶:将步骤(2)菌种种子液按重量1~2%接入步骤(4)发酵液中拌匀,在25~35℃下发酵1~5天至发酵液中果胶酶酶活达到5000酶活单位/毫升;再将该液经过滤系统或离心系统处理,使果胶酶液与固形物分离得液体果胶酶。 |