一种核酸等温扩增检测猪瘟病毒的方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种核酸等温扩增检测猪瘟病毒(CSFV)的方法及其试剂盒，检测步骤依次包括：猪瘟病毒RNA模板在60～70℃下解链后降温；加入逆转录酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶，在引物的引导下于37～42℃进行等温扩增，获得RNA扩增子；然后利用纳米金探针和捕获探针检测扩增子，通过层析杂交显色反应获得检测结果。杂交膜出现显色条带为RNA阳性，无条带为阴性。采用本方法的试剂盒可快速准确地检测猪瘟病毒RNA。

主权项

一种猪瘟病毒(CSFV)核酸等温扩增检测方法，采用逆转录-转录和纳米金探针检测层析杂交原理，其扩增对象为从CSFV中提取的RNA模板；其特征在于，RNA模板通过采用逆转录酶、核糖核酸酶H以及RNA聚合酶等温扩增，产生的大量RNA扩增子和纳米金颗粒标记的检测探针、生物素(或地高辛)标记的捕获探针结合形成杂交复合物引起光学性质变化，最后该复合物和固定在层析膜上亲和素(或抗地高辛抗体)结合形成显色检测条带。