一种淫羊藿苷化学对照品的分离制备方法

摘要

本发明涉及一种淫羊藿苷化学对照品的分离制备方法。以含量不低于20％的淫羊藿苷提取物为原料，经初步柱分离或醇沉除杂脱色，以制备型高效液相色谱为分离手段，以一定比例的含乙腈水溶液为洗脱体系，提取液直接减压浓缩至干即可获得纯度大于98％的淫羊藿苷化学对照品。相比已报道淫羊藿苷的分离制备方法，本发明工艺步骤简单、周期短、纯度高、色泽好，并且可大规模生产。

主权项

一种淫羊藿苷化学对照品的分离制备方法，其特征在于：以质量含量≥20％的淫羊藿苷提取物为原料，经初步柱分离或醇沉除杂脱色，以制备型高效液相色谱为分离手段，以一定比例的含乙腈水溶液为洗脱体系，获得纯度大于98％的淫羊藿苷化学对照品；具体步骤为：1)初步柱分离或醇沉除杂脱色：柱分离除杂脱色：淫羊藿苷提取物用水或体积浓度为40-80％的乙醇水溶液溶解，上树脂柱或聚酰胺柱分离，以乙醇-水溶液梯度洗脱，其中乙醇的体积浓度从0％-70％变化，收集体积浓度为50-70％的乙醇洗脱物，浓缩干燥得黄色粉末；或醇沉除杂脱色：将淫羊藿苷提取物用40-80％乙醇水溶液溶解，离心得沉淀物、或静置≥4小时过滤得沉淀物，沉淀物烘干后可得黄色粉末；2)高效液相制备：黄色粉末用体积浓度40-80％的乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50～150mg/ml的供试品溶液，经0.45μm微孔滤膜过滤；采用柱长为10-50cm、直径为1-10cm的高效液相制备色谱柱进行分离，六通阀或泵进样，进样体积为1-50ml，以体积浓度为15-55％的乙腈水溶液为洗脱体系，流速控制在10-400ml/min，在线紫外检测，收集纯度大于98％的淫羊藿苷流份；3)淫羊藿苷化学对照品的获得：上述流份直接浓缩至干、或用甲醇或乙醇重结晶即可得到纯度大于98％的黄白色淫羊藿苷对照品。