主权项 |
一种蜜蜂磁性奈米颗粒的纯化方法,其方法步骤为:a.收集蜜蜂:收集蜜蜂,取得腹部并挤压;b.取得铁沈积细胞:以含不锈钢网的离心管,以离心加速度离心数次,每次数分钟;c.打破细胞:细胞放在含蛋白脢抑制剂的0.5M蔗糖及0.5M食盐水的蜜蜂缓冲溶液中以均质机打破;d.过滤:滤液以不孔同径的不锈钢滤网、塑胶滤网、纸滤膜过滤纯化;e.密度梯度纯化:滤液以6.0m的蔗糖溶液以离心加速度离心60分钟,沈积物以含滤膜离心管以离心加速度离心10分钟;f.取得颗粒:取得蜜蜂的奈米磁性颗粒;该步骤d之不锈钢滤网为300mesh及400mesh孔径的不锈钢滤网过滤;该步骤d之塑胶滤网为10μm的塑胶滤网、5μm及1μm的塑胶滤网;该步骤d之滤膜为20μm的纸滤膜,10μm、8μm、5μm、3μm、1.2μm及0.65μm的纸滤膜;该步骤d之顺序以经300mesh及400mesh孔径的不锈钢滤网过滤,再经10μm的塑胶滤网过滤,20μm的纸滤膜过滤,5μm及1μm的塑胶滤网过滤,再依序经10μm、8μm、5μm、3μm、1.2μm及0.65μm的纸滤膜过滤;该步骤e之滤液以23000g离心加速度离心60分钟,沈积物再用上述条件离心一次,沈积物以0.22μm含纸滤膜离心管以23000g离心加速度离心10分钟为最佳。 |