番红花的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种番红花组织培养快速繁殖方法，该方法包括外植体灭菌、愈伤组织诱导、丛生芽诱导培养、不定芽继代培养和球茎诱导培养等步骤，最后诱导出球茎。本发明利用组织培养的方法，进行番红花愈伤组织及小球茎诱导，建立优系番红花的繁殖体系，进行种苗的工厂化育苗生产，能快速大量繁殖优系品种。

主权项

一种番红花组织培养快速繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)外植体灭菌：将球茎用水洗净，除去皮膜，置于超净工作台上消毒接种；先于70％酒精中漂洗30-40秒，再用0.1％HgCl2消毒8-10分钟，最后用无菌水冲洗4～5次，彻底洗去残余的HgCl2，将消毒后的球茎切成1-1.5cm3，接种于培养基上；(2)愈伤组织诱导：将经过消毒灭菌后的上述球茎在无菌环境中接种于诱导培养基MS+0.5mg/L NAA+5.0mg/L 6-BA培养基上中，培养20天收获愈伤组织；(3)丛生芽诱导培养：将愈伤组织接种到MS+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基上，20天在黑暗条件下，20℃培养20天，诱导出丛生芽；(4)不定芽继代培养：将丛生芽切割成单个芽后转接到MS+0.5mg/LNAA+2.0mg/L 6-BA培养基上，在黑暗条件24小时无光照下，20±2℃培养，15天后芽长到2-3cm；(5)球茎诱导培养：当芽高2-3cm时转接到MS+0.5mg/L NAA+3.0mg/L6-BA培养基，在光照条件下诱导出球茎。