色谱分离核酸混合物的方法

摘要

本发明的主题是一种色谱分离核酸混合物的方法，具体是把质粒脱氧核糖核酸(DNA)从核酸混合物的其它组分中，特别是从其它核酸中分离出并进行提纯的方法。本发明的主要特点是，无需添加核糖核酸酶就能把质粒DNA从污染的核糖核酸(RNA)中分离出来，而且所采用的都是成本低廉并对环境友好的组分。这些参数允许本发明方法应用于“大规模”生产质粒脱氧核糖核酸。此外，本发明还包括按照本发明方法制得的质粒脱氧核糖核酸在生产一种内含质粒DNA制剂中的应用，而这种制剂用于基因治疗和遗传疫苗接种。

主权项

把质粒脱氧核糖核酸从混合物的其它组分中分离出的色谱分离法，其特征在于：a)在必要时，在水溶液中用一种或多种碱金属盐和/或碱土金属盐把核酸混合物调节到相当于在pH值为4.8至5.4以及温度为20℃时为70mS至95mS的电导率；b)使核酸混合物和色谱载体材料接触；c)然后，用以pH值7至7.4为基准浓度范围在900mM至1800mM的含碱金属盐溶液和/或以pH值7至7.4为基准浓度范围在100mM至240mM的含碱土金属盐溶液，将载体材料至少洗涤一次；d)接着，用以pH值7至7.4为基准浓度为等于或高于1300mM的含碱金属盐溶液和/或以pH值7至7.4为基准浓度为等于或高于270mM的含碱土金属盐溶液，对与色谱载体材料结合的质粒DNA进行洗脱。