海洋低温α-淀粉酶基因工程菌、重组酶及应用

摘要

本发明属于生物工程领域，涉及将一种低温α-淀粉酶基因重组到表达载体上，并转化至表达宿主构成的工程菌、利用工程菌表达的重组酶及该酶在工业中的应用。本发明采用分子操作技术，通过细菌基因组的提取确规定、目的基因的扩增、表达载体的构建及重组载体转化受体细胞构建了一株工程菌EPGS230，工程菌经过培养，诱导、离心、超声破碎、离子交换和亲和层析等步骤获得纯化的重组低温α-淀粉酶。本发明所述制备工艺简单、酶活力高、作用温度低等优点。

主权项

一种核苷酸序列的表达载体，其特征在于，它是含有来源于海洋细菌Pseudoalteromonas arctica GS230的低温α-淀粉酶基因序列的表达载体pEtac-His6-amy；它由下列方法制得：将海洋细菌Pseudoalteromonasarctiac GS230低温α-淀粉酶基因的核苷酸序列扩增，与质粒pMD18-T载体连接，得到克隆载体pMD18-T-amy，再将克隆载体pMD18-T-amy和表达载体pEtac-His6分别经EcoRI和SalI双酶切后连接得到表达载体pEtac-His6-amy。