表现载体，产制异种基因产物及筛选可产制高量该等产物之重组细胞的方法

摘要

本发明系关于真核生物细胞之表现载体，其包括编码感兴趣之蛋白质的基因，在功能上与仓鼠-泛素/S27a-启动基因连接，以及编码萤光蛋白质的基因。该表现载体最好亦含有可扩大的可选择标记基因。本发明亦描述宿主细胞，最好是哺乳动物细胞，已经利用该表现载体将其转移感染，产制异种基因产物的制程，以及筛选高-生产细胞的方法。

主权项

一种筛选表现所欲蛋白质/产物之宿主细胞的方法，其包括：a)提供一表现载体，其包含编码所欲蛋白质/产物的基因，该基因系功能上连接至(i)仓鼠-泛素/S27a-启动子，及(ii)编码萤光蛋白质之基因，其中该仓鼠-泛素/S27a-启动子系位于编码序列之上游，且其中该编码序列系自相同仓鼠-泛素/S27a-启动子开始表现，b)以根据步骤a)之表现载体转染一真核寄主细胞，c)在容许表现所欲蛋白质/产物和萤光蛋白质的条件下培养该宿主细胞的族群，d)分离一细胞库，在无须基因扩大步骤情况下，该等细胞每天每个细胞表现超过15微微克(pg)之平均比生产力(specific reproductivity)(单链蛋白质)或10微微克(人类化抗体)重组蛋白质，e)监别及/或筛选萤光蛋白质之最大表现量之细胞。