检测仔猪常见致病菌的基因芯片、试剂盒及方法

摘要

本发明提供一种“检测仔猪常见致病菌的基因芯片、试剂盒及方法”，属于动物医学诊断领域。所述基因芯片上设置有仔猪致病菌的23S rDNA特异性探针序列，能够检出多种仔猪致病菌菌种下属的多种致病菌株；本发明还提供两对通用引物，与基因芯片共同组合成检测试剂盒，通过通用引物扩增待测菌，一方面能数倍扩大其模板浓度，提高芯片检测灵敏性，另一方面，通过通用引物扩增过程获得的荧光标记片段与芯片探针结合的特异性明显高于芯片直接杂交待测菌DNA；本发明还提供上述通用引物和芯片的使用方法。本发明的基因芯片、试剂盒及检测方法为及时检测出致病菌种类，预防仔猪疫情蔓延提供了一种实用方便的工具。

主权项

1.一种检测仔猪致病菌的基因芯片，其特征在于芯片基质上设置有仔猪致病菌的23S rRNA特异性探针序列，所述仔猪致病菌及其23S rRNA特异性探针序列如下：猪放线杆菌(A.suis)，ATAGCAGTAGACACAGAAGAACGAGC；胸膜肺炎放线杆菌(A.pleuropneumoniae)，AGTGATAATGGTTTTGTTAGGAGAAT；多杀性巴氏杆菌(P.multocida)，CCGTACTCGAAAGTATGTTAGTGGAACTAA；副猪嗜血杆菌(H.parasuis)，GTAGGTTGTAAGAGTATACCTCCGA；猪链球菌(Strep.suis)，TAAGCAGTGAGGTGTGATATGAGTC；支气管败血波氏杆(Bordetella bronchiseptica)，ATGAAGGGGTCGCAGAGAATCGGTG；表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)，GTTTCCTCGAGTCGTTGATTTCACAC；空肠弯曲菌(Campylobacter.jejuni)，GGATAGAAGAACCCCTGATGCCGTC；产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)，AACCGAAGTACATGATTCCACGCTGCCA；猪肺炎支原体菌株(Mycoplasma hyopneumoniae)，AGTACCGAATTAAATGACTCTCTGTT；肠道沙门菌(Salmonella enterica)，CACGTAGGTGAAGTGATTTACTCATG；大肠杆菌(Escherichia coli)，GTAGGTGAAGCGACTTGCTCGTGGA；和/或大肠杆菌(Escherichia coli)，GCTGATATGTAGGAGAAGTCCCTCGCGG。