一种多杀菌素制备工艺

摘要

一种多杀菌素制备工艺，其包括放线菌刺糖多孢菌S078-8发酵工艺和利用放线菌刺糖多孢菌S078-8发酵所得含多杀菌素的发酵液提取多杀菌素结晶产品的工艺两部分。本发明的优点，一是产率高，经HPLC测定，多杀菌素产量最终达到2000-4000mg/L以上，特别是，杀虫效价最高的正丁基多杀菌素成分，发酵液内的含量达到1500-2800mg/L；二是多杀菌素结晶产品纯度高，达到95％-98％。

主权项

1.一种多杀菌素制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)将放线菌刺糖多孢菌S078-8菌种接种于装有种子培养液的摇瓶内，在28-34℃条件下，培养2-3天，将该种子液接入种子罐，接种时，该罐培养基pH为6.0～8.0；(2)对种子罐装入培养基，灭菌后，接入经活化的摇瓶种子液；(3)对发酵罐装入培养基，灭菌后，冷却至28-34℃，按投料体积的5～15％移入种子液；(4)种子罐培养：在温度28-34℃，罐压0.3-0.6Kg/cm2，通气量1∶0.7-1∶09(V/V)，搅拌速率200-300rpm条件下培养2-3天；(5)发酵罐培养：在温度28-34℃，罐压0.3-0.8Kg/cm2，通气量1∶0.4-1∶1.5(V/V)，搅拌速率200-600rpm条件下培养9～12天；用显微镜检查有60～80％的菌丝体裂解时，终止发酵，放罐，即得含多杀菌素的发酵液；所述种子培养基配方为：葡萄糖10～20g/L，大豆粉30～60g/L，酵母粉6～12g/L，硫酸镁1.8～3.6g/L，泡敌0.02％～0.08％，灭菌前pH为7.0～9.0，灭菌后pH为6.0～8.0；所述发酵罐培养基配方为：葡萄糖100～200g/L，酵母粉1.0～4.0g/L，豆饼粉6.0～10.0g/L，玉米粉8～12g/L，油酸甲酯25～100ml/L，碳酸钙3.0～6.0g/L，棉籽粉24～36g/L；泡敌0.02％～0.08％，，灭菌前pH为7.0～9.0，灭菌后pH为6.0～8.0。