检测与酿造有关的微生物的方法和可用于此方法的核酸分子

摘要

本发明涉及检测与酿造有关的微生物的方法和可用于此方法的核酸分子及其组合。此外，本发明还涉及用于鉴别和/或鉴定和/或确定与酿造有关的微生物的属或种的核酸分子及其组合的使用方法。为此，本发明目的在于提供检测啤酒及其酿造原料的微生物污染的最快速的方法和手段。此测试应包括鉴别所有可致啤酒污染的微生物。本发明通过以下步骤完成上述任务：(a)将样品与至少包括两个核酸分子(引物)的组合接触，此核酸分子与和酿造有关的微生物核酸的一个保守区域杂交；(b)扩增微生物的核酸分子或其一部分，以产生至少一个扩增片段。(c)将在步骤(b)中获得的扩增片段与至少一个二级的核酸分子(探针)接触，上述二级核酸分子与至少一个扩增片段进行杂交，这个扩增片段包括一个对于所有与酿造有关的微生物的，或对于一个或多个与酿造有关的微生物的科、属、种的微生物核苷酸的特异的片段；(d)鉴别至少一个由扩增片段和从c)中得出的二级核酸分子共同构成的杂交核酸分子。

主权项

1.检测样品中L.brevis菌的方法。该方法包括下列步骤：(a)将样品与至少包括两个一级核酸分子(引物)的组合接触，此核酸分子与Lactobacillus brevis，Lactobacillus lindneri，Lactobacillus casei，Lactobacillus paracasei，Lactobacilluscoryniformis，Lactobacillus curvatus，Pediococcus damnosus，Pediococcus inopinafus，Pectinatus cerevisiiphilus，Pectinatusfrisingiensis，Pectinatus sp.DSM 20764，Megasphaeracerevisiae，Selenomonas lacticifex，Zymophilus paucivorans，Zymophilus raffinosivorans菌中的核酸的一个保守区域杂交；其中所说的至少两个一级核酸分子来源于L.brevis的23S-5S之间的基因内间隔区，或相邻的23S或5S rDNA基因区域，也就是序列表1；(b)扩增微生物核酸分子或其一部分，以产生至少一个扩增片段；(c)将在步骤(b)中获得的扩增片段与至少一个二级的核酸分子(探针)接触，上述二级核酸分子与至少一个扩增片段进行杂交，这个扩增片段包括一个对于Lactobacillus brevis菌种的微生物核苷酸的特异的片段；其中所说的至少一个二级核酸分子来源于L.brevis的23S-5S之间的基因内间隔区，或相邻的23S或5S rDNA基因区域，也就是序列表1；(d)鉴别至少一个由扩增片段和从c)中得出的二级核酸分子共同构成的杂交核酸分子。