TRANSLECTURA REGULADA DE CODONES DE TERMINACION.

摘要

Un procedimiento para evaluar selectivamente o seleccionar células que expresen un nivel deseado de un polipéptido, que comprende: a) proporcionar una pluralidad de células eucariotas en la que cada una comprende un casete de expresión que comprende un primer polinucleótido que codifica el polipéptido; al menos un codón de terminación secuencia abajo del primer polinucleótido y un segundo polinucleótido que codifica un péptido de anclaje a la membrana celular secuencia abajo del codón de terminación; b) cultivar las células en presencia de un agente de inhibición de la terminación en condiciones que permitan la expresión del polipéptido, siendo el agente de inhibición de la terminación un antibiótico de aminoglicósido; y c) usar una citometría de flujo para seleccionar al menos una célula que exprese el polipéptido fusionado con un péptido de anclaje a la membrana celular.