一种重组人角质细胞生长因子的生产方法

摘要

本发明涉及一种重组人角质细胞生长因子的生产方法，特别涉及一种利用基因重组技术制备人角质细胞生长因子的生物活性多肽的方法，该方法包括以下步骤：a.人工合成人角质细胞生长因子氨基酸编码区相对应的基因；b.步骤a得到的基因与适宜的表达载体上的谷胱甘肽S-转移酶蛋白基因3′端融合，该基因中间部分含凝血酶或者肠激酶识别位点；c.将含有融合蛋白编码基因的适宜的表达载体转化适宜的大肠杆菌获得基因工程菌；d.该基因工程菌经发酵后，经提取层析纯化步骤，制备出GST-KGF融合蛋白；e.再经凝血酶或者肠激酶切割后，分离纯化获得重组入角质细胞生长因子。

主权项

1、一种人角质细胞生长因子的制备方法，包括以下步骤：a.人工合成人角质细胞生长因子氨基酸编码区相对应的基因；b.步骤a得到的基因与适宜的表达载体上的GST蛋白基因3′端融合，中间含肠激酶或者凝血酶识别位点；c.将含有融合蛋白编码基因的适宜的表达载体转化适宜的大肠杆菌获得基因工程菌；d.该基因工程菌经发酵后，经提取层析纯化步骤，制备出GST-KGF融合蛋白；e.再经肠激酶或者凝血酶切割后，分离纯化获得重组人角质细胞生长因子；其中所述GST-KGF融合蛋白的氨基酸序列见序列表2和4。