黑曲霉发酵生产四草酸钾的方法

摘要

一种黑曲霉发酵生产四草酸钾的方法，该方法包括黑曲霉的分离纯化，及黑曲霉的液体发酵培养：每升PDA液体培养基，加入蔗糖5～25g，pH值调节至4.7～6.4，无菌状态下，黑曲霉孢子接种量为1％，孢子浓度为1×10⁴～10⁶cfu/mL、培养温度为30～40℃，恒温发酵培养72-100小时，过滤菌丝，发酵液浓缩至培养液总体积的1/20～1/15，析出结晶，超纯水洗涤、烘干，得四草酸钾白色粉末状产品。本发明将黑曲霉的分离纯化与其液体发酵培养相结合，使用马铃薯、蔗糖作为基本培养基质，安全、无毒害，实现了四草酸钾的全程、全能环保型生产，生产成本大幅下降。

主权项

1、一种黑曲霉发酵生产四草酸钾的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：a、黑曲霉的分离纯化：选取皱边石杉植株的茎段，经流水冲洗2-3小时→75％酒精消毒1～2min→0.01mol/L盐酸、5％次氯酸钠、2.4mmol/L柠檬酸依次冲洗一遍→5％次氯酸钠消毒10～12min→无菌水冲洗3—5次→10％双氧水消毒8-12min→无菌水冲洗4～5次→无菌吸水纸上吸干表面水→接种于PDA平板上→分离、纯化得到黑曲霉。b、黑曲霉的液体发酵培养：每升PDA液体培养基，加入蔗糖5～25g，pH值调节至4.7～6.4，无菌状态下，接种黑曲霉孢子，黑曲霉孢子加入量为1升PDA培养液加1％(体积)黑曲霉孢子，孢子浓度为1×104～106cfu/mL、培养温度为30～40℃，转速为120～150转/分钟，通空气量为培养液总体积即PDA培养液、蔗糖和黑曲霉孢子接种量的总和的30％，恒温发酵培养72-100小时，过滤菌丝，发酵液浓缩至培养液总体积的1/20～1/15，析出结晶，超纯水洗涤4～5次，40～50℃烘干，得四草酸钾产品。