PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DE PEPTIDOS AMIDADOS CARBOXI-TERMINALES.

摘要

Procedimiento para la producción de péptidos amidados en el terminal C de fórmula general II (AS)n-Xm-NH2 (fórmula II) en la que AS significa uno o más aminoácidos genéticamente codificables; n es de 5 a 2000, preferentemente de 10 a 1000, en particular 15 a 500, muy especialmente preferentemente de 20 a 400; y (AS)n y/o (AS)n-Xm significa preferentemente un péptido o proteína biológicamente activo, X significa uno o más aminoácidos básicos o uno de sus derivados, preferentemente lisina, histidina y/o arginina, en particular lisina; m es de 1 a 15, preferentemente de 3 a 10, en particular de 6 a 8; y n y m significan números enteros y en la que a) células huésped se cultivan en un medio nutriente adecuado, b) se expresa un compuesto de fórmula general I: (AS)n-XmYp (fórmula I), en la que Y significa uno o más aminoácidos con carga neutra, preferentemente glicina, p es de 1 a 10, preferentemente de 1 a 5, en particular 1; a) opcionalmente el compuesto de la fórmula I se libera de un péptido precursor adecuado por escisión enzimática o química; b) los productos de expresión de la etapa b) o los productos intermedios de la etapa c), eventualmente después de una etapa de purificación, se hacen reaccionar con una enzima alfa-amidante (PAM); y c) el péptido amidado en el terminal C de la fórmula general II se purifica de manera adecuada, preferentemente por un método cromatográfico preparativo.