红色荧光特异性标记线粒体细胞系的建立及应用

摘要

本发明提供一种红色荧光特异性标记线粒体的Vero细胞系V-Mito，通过在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2-Mito转染Vero细胞，经含G418的培养基进行阳性克隆筛选，挑取阳性克隆扩大培养建系，命名为V-Mito。所述细胞的细胞器线粒体在激发光下能稳定发出红色荧光，特异性地显示出线粒体形态。红色荧光特异性标记线粒体的细胞系V-Mito，对细胞无损伤，不影响细胞生物学活性，遗传性能稳定，可多次传代，无限增殖，使用方便，成本低廉。细胞系V-Mito在细胞正常和非正常生理状态下及其在病原菌或病毒感染状态下的研究方面有着广阔的应用前景。

主权项

1. 一种红色荧光特异性标记线粒体细胞系，其特征在于：所述细胞的细胞器线粒体在激发光下能稳定发出红色荧光，特异性地显示出线粒体形态，其微生物保藏号为：CGMCC NO.2770，命名为：Vero细胞，微生物(株)是V-Mito，所述细胞系通过以下方案建立：在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2-Mito转染80％单层铺满的Vero细胞，经含G418的培养基进行筛选阳性克隆，激光共聚焦显微镜观察，线粒体特异性染料进行染色，反复传代、冻存、复苏建立稳定的红色荧光特异性标记线粒的细胞系V-Mito。