体外检测精子-卵母细胞相互作用的方法

摘要

一种体外检测精子-卵母细胞相互作用的方法，包括：a.上泳法或密度梯度法提取精子；b.在培养液中按一定比例混合经步骤a提取后的精子与卵母细胞，另设立卵母细胞空白对照，并均置于培养箱中反应；c.去除步骤b中未与卵母细胞表面结合的精子，倒置相差显微镜下检测与卵母细胞透明带结合的精子数量；d.使步骤c中与卵母细胞透明带结合的精子和卵母细胞分离，分别收集分离后的精子和卵母细胞；e.将卵母细胞空白对照精子、经步骤d分离后的精子涂于载玻片上，干燥，固定液固定，洗涤，加入荧光素-凝集素标记物，反应后再次洗涤，荧光显微镜下检测精子顶体反应率；f.倒置相差显微镜下检测经步骤d分离的卵母细胞胞内已穿透进入其中的精子数量。所述方法减少了标本资源的消耗，降低了检测成本和检测时间，提高了检测效率。

主权项

1. 一种体外检测精子-卵母细胞相互作用的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：a. 上泳法或密度梯度法提取精子；b. 在培养液中按一定比例混合经步骤a提取后的精子与卵母细胞，另设立卵母细胞空白对照，并均置于培养箱中反应；c. 去除步骤b中未与卵母细胞表面结合的精子，倒置相差显微镜下检测与卵母细胞透明带结合的精子数量；d. 使步骤c中与卵母细胞透明带结合的精子和卵母细胞分离，分别收集分离后的精子和卵母细胞；e. 将卵母细胞空白对照精子、经步骤d分离后的精子涂于载玻片上，干燥，固定液固定，洗涤，加入荧光素-凝集素标记物，反应后再次洗涤，荧光显微镜下检测精子顶体反应率；f. 倒置相差显微镜下检测经步骤d分离的卵母细胞胞内已穿透进入其中的精子数量。