在基因表达中有用的转录激活因子的DNA结合位点

摘要

我们发现了被PrtT特异性识别的DNA结合位点，PrtT是针对蛋白酶基因的转录激活因子。可通过共有核苷酸序列对所述DNA结合位点加以结构定义，以及通过PrtT经由该序列调控转录激活的能力对所述DNA结合位点加以功能定义。PrtT及其同性质的DNA结合位点(即，每种启动子中被PrtT识别的核苷酸序列)均可用于基因表达系统。仅具有PrtT转录激活因子是不够的，其同性质的DNA结合位点对于PrtT的识别(即，结合到该位点并在合适的条件下激活转录)来说是必要的。功能性位点，例如从野生型真菌基因获得的功能性位点将向3’下游序列赋予PrtT依赖性转录激活。野生型启动子的导致非功能性位点的突变将使得3’下游序列的PrtT依赖性转录激活消失。野生型启动子的导致更具功能性的位点的突变将增强3’下游序列的PrtT依赖性转录激活。

主权项

1. 经分离的多核苷酸，其包含针对PrtT转录激活因子的双链DNA结合位点，其中，所述位点第一链的至少32个碱基与5′-G/C(N)5C C G A/TC G G(N)19G/C-3′(SEQ ID NO：22)在序列上相同，所述位点的第二链与所述第一链互补，并且，PrtT与所述位点的结合将激活宿主细胞中下游核苷酸序列的转录。