发明名称 一种琼脂糖疏水层析介质及其在纯化酵母表达HBsAg中的应用
摘要 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质,结构式如式I所示,是以琼脂糖凝胶为基质,经环氧活化后与丁硫醇偶联,制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60~1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质;-O-R-S(CH<sub>2</sub>)<sub>3</sub>CH<sub>3</sub>式I其中:代表琼脂糖凝胶,为选自琼脂糖6FF、琼脂糖4FF、琼脂糖CL-6B、琼脂糖CL-4B、琼脂糖6B和琼脂糖4B中的一种。该琼脂糖疏水层析介质可用于纯化酵母表达HBsAg。与现有技术相比,本发明的优点在于:介质机械强度高、通透性好,介质配基密度可控,分离效果良好。该介质的制备工艺简单,易于放大。
申请公布号 CN100486688C 申请公布日期 2009.05.13
申请号 CN200610001813.8 申请日期 2006.01.20
申请人 中国科学院过程工程研究所 发明人 赵岚;苏志国;闭静秀;周卫斌;王阳木;李岩;黄永东
分类号 B01J20/291(2006.01)I;C12N1/02(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 主分类号 B01J20/291(2006.01)I
代理机构 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 代理人 高存秀
主权项 1、一种琼脂糖疏水层析介质的制备方法,包括以下步骤:1)活化:向100.0g琼脂糖凝胶中加入150mL有机溶剂、75~150mL环氧活化剂及75mL氢氧化钠溶液,在25~60℃下搅拌反应4~10小时,反应结束后,用水洗涤并真空抽去溶剂,重复三次,得到环氧活化的琼脂糖凝胶;所述的有机溶剂为丙酮、二氧六环、二甲基甲酰胺、甲醇或乙醇;2)偶联:将100.0g步骤1)得到的环氧活化的琼脂糖凝胶中加入100~2000μL丁硫醇、10mL乙醇及90ml氢氧化钠溶液,在25~60℃下搅拌反应6~10小时,反应结束后,用水洗涤并真空抽去溶剂,重复三次,得到琼脂糖疏水层析介质;所制得的琼脂糖疏水层析介质的结构式如式1所示,是以琼脂糖凝胶为基质,经环氧活化后与丁硫醇偶联,制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60~1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质;所述式1如下:<img file="C200610001813C00021.GIF" wi="723" he="94" />式1其中:<img file="C200610001813C00022.GIF" wi="101" he="95" />代表琼脂糖凝胶:R为-CH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>-,-CH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>O(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>OCH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>-,-CH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>Q(CH<sub>2</sub>)<sub>4</sub>OCH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>-,或-CH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>O(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>O(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>OCH<sub>2</sub>CH(OH)CH<sub>2</sub>-。
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