柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆、表达及应用

摘要

本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)蛋白质二硫键异构酶基因EtPDI(克隆号：BW1-E06，Genbank登录号EF552214)，本发明将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2，构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtPDI，并在大肠杆菌系统中进行了表达，表达的重组蛋白大部分以可溶性形式存在。通过纯化重组蛋白4T-EtPDI进行SPS-PAGE，再转移至PVDF膜上，用E.tenella卵囊口服免疫鸡的抗血清作为-抗，羊抗鸡IgG作为二抗进行Western-blot分析，表明它有一定的抗原性。能用于制备抗鸡球虫病药物和抗鸡球虫病疫苗。

主权项

1、一种柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因，其特征在于所述柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因具有下列序列：TCACAATCTAATTCCCTTTTCACTCACATTTTCTCAAGATGCTGCCTCAGTACTGCTCTCCCTACAATGCCGAGAAGCGCCGTTTTAATGAGGAGCAGATTCTCGCTGCGGGTGGCAAGGAAGGCGCCGCTGCCCCAGCAATGCCAATGCCACCTGCCTACAGAGATATGGACCTAATTCTGTTCCCGGAGGGCAGCCTGAAGGACTCAAATGGCAACGTGGTGTCCCAGCAGCACCTCATAGGCAAATCTGTTGGACTTTATTTTGCCGATGGCAGCAGCCCGAAGTGCAGCAGCTTCCTGCCGTTCCTTCTCCAGTTTTACCGCACGGTCAACGAGGGAGGCTCTCACCAGAAGATCGAAGTGGTTTTCGTGTCAGCGGACAAGGACGAAAGGGCTTTTCAAGATCACGTTAAGCACATGCCTTGGCTCGTCATTGACTTCAACGACCCCCTGAGAACGATCTTGCTCAGACACTTCAGGGTTGAGAAGGAAGCTAGTGTGCCCACCCAAGGCCAGGGCCCTCGCGCTGGCGTCCCCTCCTTGGTAGTTGTTGGCTCTGACGGGCGGGACGCCCAGTTCCTCCAAGTTAGTGGGGGCAGAGACGAAGGAGAGCGAGCCTTGCTCAGATGGGACTGGAGAAACACGAAGTTTGGAGCTGACCGGTTTCTTGTGCGTCGTGAAGGCTAAGTGCCTAGGTAGCTTAGTAGCTACCCAAACAGCTAGTAAAGCCACCCCTTTGCAGCTAGTTAAGCGGACTCAGCTAGCTAGCCAGCATCTAGTTGGGTTGCATTGTTCATTAAGAGGGACCCGCCCTTACCGCTCATATGTAGCTGGGGCAGAAACAGCCCCAGTTGCAGTAGTGATTGCAGCAAACAGACGCAGCGGGAGCAGCAGAAGTAGCAGCAGCAGCATGCTGCTACAGTAGCAAGAACCCGTACCAGCAGCTGCAGCAGCAAGAACCCGTAGCAGCAGCTGCCCGCTGCAGCGGCAGCAGCTGGGGGGAAGCTGATGTAACATCTGACGTTTTTTACGTAAACGAAATCCGTCAAAAATG。