土鳖干粉提取物的制备及其应用

摘要

本发明公开了土鳖干粉提取物的制备方法。本发明方法包括水提法或酶解法，土鳖干粉先水提或酶解，将水提液或酶解液通过Sephadex G25柱层析分离，得到系列多肽组分，再将所分离的多肽组分经冷冻干燥制备成冻干粉。经小鼠耳肿胀模型评价表明，本发明的土鳖干粉提取物系列多肽组分对于疼痛均有显著的抑制作用。小鼠1个月喂养实验表明，本发明的多肽组分既无毒性也无依赖性。本发明提供了土鳖干粉提取物系列多肽组分在制备镇痛药物中的应用。

主权项

1、土鳖提取物的制备方法，其特征在于该方法为水提法，包括下列步骤：(1)土鳖水提多肽粗粉的制备：将土鳖干粉与蒸馏水按3:100w/v的比例悬浮、50℃±3℃恒温搅拌60分钟、过滤、滤液冷冻干燥、得到的水提多肽粗粉4℃保存；(2)土鳖水提多肽粗粉的分离与纯化：将水提多肽粗粉与蒸馏水按6:1w/v的比例溶解、10000转离心10分钟、上清液加载到Sephadex G25层析柱上、以0.007mol/L乙酸胺缓冲液洗脱，流速0.8mL/min，紫外检测波长280nm、收集的馏份按峰合并、冷冻干燥、得到WI、WII、WIII和WIV四种水提多肽组分；(3)得到的WI、WII、WIII和WIV四种水提多肽组分制成冻干粉。