发明名称 有机溶剂增强高GC含量DNA片段扩增效率的方法
摘要 本发明涉及一种有机溶剂增强高GC含量DNA片段扩增效率的方法,包括(1).待扩增DNA的提取、(2).PCR体系的配置及优化、(3).PCR条件的设定与运行、(4).PCR产物电泳检测,其中PCR体系的优化是在PCR反应体系中添加有机溶剂,PCR产物电泳检测采用1%琼脂糖凝胶,跑胶后用EB液染色,然后用紫外分光透射仪观察扩增片段在凝胶中的位置,并与相应的分子量标准做对照。本发明使用的优化剂为普通化学试剂,价格便宜,可获得性强;优化剂易于长期室温保存,使用方便。本发明对富含GC碱基DNA片段的扩增效果明显,使得针对高GC含量序列的扩增更具有效率和目的性。这对分子生物学技术试验的发展将具有重大理论意义和应用价值。
申请公布号 CN101381755A 申请公布日期 2009.03.11
申请号 CN200810151276.4 申请日期 2008.09.10
申请人 天津科技大学 发明人 张治洲;杨霞;刘芳;孟良玉
分类号 C12P19/34(2006.01)I 主分类号 C12P19/34(2006.01)I
代理机构 天津盛理知识产权代理有限公司 代理人 王来佳
主权项 1. 一种有机溶剂增强高GC含量DNA片段扩增效率的方法,包括(1).待扩增DNA的提取、(2).PCR体系的配置及优化、(3).PCR条件的设定与运行、(4).PCR产物电泳检测,其特征在于:PCR体系的优化是在PCR反应体系中添加有机溶剂,PCR产物的电泳检测采用1%琼脂糖凝胶,跑胶后用EB液染色,然后用紫外分光透射仪观察扩增片段在凝胶中的位置,并与相应的分子量标准做对照。
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