发明名称 利用罗非鱼内脏提取SOD酶的方法
摘要 本发明公开了一种利用罗非鱼内脏提取SOD酶的方法,包括以下步骤:罗非鱼内脏和生理盐水以1∶5(w/v)比例混匀,在50-65℃水浴加热保温5-12min,用组织捣碎机匀浆破碎,离心,取上清液,用可截留分子量为50kD的膜超滤系统进行超滤,取超滤液,用硫酸铵或磷酸钠对超滤提取液进行分离纯化,静置2-4h后,离心,收集沉淀物;将沉淀物用蒸馏水溶解,用可截留分子量为5-10kD的膜超滤系统进行超滤,脱盐、去除小分子物质,收集浓缩液;然后进行冷冻干燥,即得到高活性的SOD粗酶制品。该工艺简单,生产周期短,适合于工业化生产,有效解决罗非鱼加工废弃物的出路,使资源得到高效利用。
申请公布号 CN100453641C 申请公布日期 2009.01.21
申请号 CN200610033928.5 申请日期 2006.02.28
申请人 中国海洋大学;中国水产科学研究院南海水产研究所 发明人 吴燕燕;李来好;林洪;郝志明;杨贤庆;刁石强;周婉君
分类号 C12N9/08(2006.01) 主分类号 C12N9/08(2006.01)
代理机构 广州知友专利商标代理有限公司 代理人 宣国华
主权项 1.一种利用罗非鱼内脏提取SOD酶的方法,其步骤包括:a.匀浆:罗非鱼内脏和加有1.2g/L氯化铜的生理盐水以重量体积比为1∶5的比例混匀,在50-65℃水浴加热保温5-12min,用组织捣碎机匀浆破碎,离心去除杂蛋白沉淀,取上清液;b.超滤:取离心上清液,用可截留分子量为50kD的膜超滤系统进行超滤,取超滤液;c.分离纯化:将超滤后所得的溶液调PH至6~9,采用硫酸铵或磷酸钠对超滤提取液进行分离纯化,静置2-4h后,用10000r/min的冷冻离心机进行离心15-20min,收集沉淀物;d.二次超滤:将沉淀物用蒸馏水溶解,用可截留分子量为5-10kD的膜超滤系统进行超滤,进行脱盐、去除小分子物质,收集浓缩液;e.冷冻干燥:将浓缩液进行冷冻干燥,即得到高活性的SOD粗酶制品。
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