发明名称 复殖之人类红血球生成素基因及其产品
摘要 描述得自人胎肝并提供出人意表之高表现位准的人红血球生成素( EPO )复殖基因。亦描述该基因于活体外表现以生产活性人 EPO 。
申请公布号 TW203100 申请公布日期 1993.04.01
申请号 TW074102884 申请日期 1985.07.02
申请人 遗传学学会有限公司 发明人 肯尼士.杰克伯;爱德华.佛瑞兹;罗德尼M.海威克
分类号 C12N15/13;C12N15/85 主分类号 C12N15/13
代理机构 代理人 林敏生 台北巿南京东路二段一二五号七楼伟成第一大楼
主权项 1﹒一种可编码人类红血球生成素(EPO)之cDNA﹐其具 有如下所示之 核酸序列:2﹒一种供制备人类重组红血球生成 素的方法,其包含在适 当的培养基中,培养COS或CHO细胞,该细胞系用含有 如申请专利范 围第1项之人类cDNA成其片段的转移载体,诸如﹐质 体PTFL6, 质体PTFL13,质体PK1─4,由来自质体PTFL13之DNA 与来自质体AdD26SVp(A)1之DNA连接所得的DNA,质体 RKFL13或质体BPV—EPO,予以转形;以及自该培养基分 离出 人类红血球生成素。 2﹒一种供制备具如下所示胺基酸序列之人类重组 红血球生成素的方法,其包 含在适当的培养基中,培养COS或CHO细胞﹐该细胞系 用含有具下列 核酸序列之人类基因群DNA或其片段的转移载体, 诸如﹐质体CZ1 ─3或质体CZ2一1,予以转形;以及自该培养基分离出 人类红血球生 成素。图示简单说明 第1图为一个人类EPO基因的一个87 对氮硷基对exon之氮硷基序列; 第2图例示于人类胎肝mRNA侦检EPO mRNA 第3A图例示-HEPOFL l3核17 酸序列演绎得之EPO蛋白质胺基酸序列; 第3B图例示于-HEPOFLl3.中演 译出之EPO cDA核17酸序列及由其演绎得 之胺基酸序列; 第4A图例示4个不相关的人EPO基 因组纯株之DNA插入物之相对位置; 第4B图例示人EPO基因表现内作用 子及外作用子结构拼图; 第4C图例示第4B图所例示之EPO 基因之DNA序列; 第5A、5B及5C图例示媒介 910233(B)之营构; 第6图例示COS-1细胞产生之EPO 与天然EPO比较其SDS聚丙烯醯胺胶分析 ; 第7图例示EPO纯株,-HEPOFL 6.之核17酸及胺基酸序列; 第8图例示EPO纯株,-HEPOFL 8之核17酸及胺基酸序列; 第9图例示EPO纯株,-HEPOFL l3. 之核17酸及胺基酸序列; 第10图图解例示质体PRKI-4; 第11图图解例示质体pdBPV-- MMTneo(342-12)。
地址 美国