一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法

摘要

本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

主权项

1、一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板I中，振荡培养；(2)将微孔板I离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应；(3)转化结束后，微孔板I离心，将微孔板I中每孔的上清液稀释后依次转移至微孔板II中，向微孔板II中加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株；(4)将蔗糖异构酶高产菌株放大培养，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，用薄层色谱检测蔗糖转化液中的产物比例，得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。