可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法

摘要

本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱甘肽衍生物为靶抗原，通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行筛选，得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达载体上，转化大肠杆菌或酵母细胞，在原核或真核中表达并纯化单链抗体蛋白；用化学突变法在抗体的底物结合部位引入GPX的催化基团SeCys。或用基因突变技术和营养缺陷型大肠杆菌直接表达在底物结合部位含有GPX催化基团的可溶性单链抗体蛋白，赋予抗体以GPX的催化活性。本发明的制备方法简单；制备的人源含硒单链抗体酶活力高；所表达的蛋白为可溶性；有利于大规模生产，在生物制药方面有广阔的应用前景。

主权项

1、一种用于制备人源含硒单链抗体酶的人源单链抗体，其特征是，由15个氨基酸组成的短肽连接，氨基酸序列包括免疫球蛋白的轻链和重链可变区；人源单链抗体B3和人源单链抗体D8的氨基酸序列分别是，B3的氨基酸序列：MAQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYAMHWVRQAPGQRLEWM50GWINAGNGNTKYS63QKFQGRVTITRDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR100RGAYQNGPANWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGSALSSELTQDPAVSVAL150GQTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNNRPSGIPDRFSGS200SSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGHPSVFGGGTKLTVLG245；D8的氨基酸序列：MARVQLVQSGAEVKKTGSSVKVSCKASGYTLTYRYLHWVRQAPGQALEWM50GWITPFNGNANYAQKFQDRVTITRDRSMSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR100RGAYQNGPANWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGSALSSELTQDPAVSVAL150GQTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNNRPSGIPDRFSGS200SSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGNHVFGGGTKLTVLG244。