发明名称 |
重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法 |
摘要 |
本发明涉及生物技术领域,公开了一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法。本发明的目的是针对蟑螂过敏原浸提液进行免疫耐受治疗的不足,从常见的蟑螂种属美洲大蠊组织中提取总RNA,扩增出美洲大蠊主要过敏原基因Per a1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的编码基因,通过基因工程手段,在大肠杆菌中低温诱导表达重组蟑螂过敏原蛋白,可用于蟑螂引起的过敏反应疾病的诊断和治疗,避免了天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。 |
申请公布号 |
CN100441685C |
申请公布日期 |
2008.12.10 |
申请号 |
CN200610036646.0 |
申请日期 |
2006.07.21 |
申请人 |
汕头大学医学院 |
发明人 |
何韶衡;张忠芳 |
分类号 |
C12N15/09(2006.01);C12N15/12(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N1/21(2006.01);C07K1/14(2006.01);C12P21/02(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/09(2006.01) |
代理机构 |
广州粤高专利代理有限公司 |
代理人 |
陈卫 |
主权项 |
1、一种重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 7.01的表达方法,其特征在于包括如下步骤:(1)从美洲大蠊组织中提取总RNA;(2)合成引物:pET-Per a 7.01-P 1GAATTCGACGCGATCAAGAAGAAGATGpET-Per a 7.01-P2GCGGCCGCGTTGCCAATAAGTTCGGTGAAAG(3)以总RNA为模板,通过RT-PCR获得美洲大蠊过敏原蛋白编码基因片段;(4)将编码基因克隆入原核表达载体中,转化宿主菌,培养所得重组工程菌,然后诱导其表达目的蛋白;(5)采用亲和层析方法对目的蛋白进行纯化,从而获得重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 7.01。 |
地址 |
515031广东省汕头市新陵路22号 |