发明名称 |
伤寒沙门氏菌快速检测试剂盒的制备和检测方法 |
摘要 |
本发明涉及一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术进行菌样的快速检测的方法,具体说是一种伤寒沙门氏菌快速检测试剂盒的制备和检测方法。该试剂盒内包括环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶、显色剂;环介导等温扩增反应液中含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、上游内引物5-TTACGTCACCAACGAC ACGGGACGTATTGGGCAATGACTGG-3、下游内引物5-CGGTAAATACCATCCCCACGGCT AACGCAGCGAGAATGGC-3、上游外引物5-GTCGCGTACTTTACGCCAT-3、下游外引物5-ACCCTGACCATCCACCAG-3和甜菜碱;检测伤寒沙门氏菌的方法包括细菌DNA的提取、伤寒沙门氏菌的环介导等温扩增、显色检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。 |
申请公布号 |
CN101255460A |
申请公布日期 |
2008.09.03 |
申请号 |
CN200810015002.2 |
申请日期 |
2008.03.25 |
申请人 |
山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
发明人 |
梁成珠;高宏伟;贾俊涛;林超 |
分类号 |
C12Q1/10(2006.01);C12Q1/68(2006.01) |
主分类号 |
C12Q1/10(2006.01) |
代理机构 |
青岛海昊知识产权事务所有限公司 |
代理人 |
张中南 |
主权项 |
1.一种伤寒沙门氏菌快速检测试剂盒,其特征在于其中的试剂包括(1)-(4):(1)环介导等温扩增反应液:包括10×Thermopol反应缓冲液、300-500μmol/L dNTP、2-4mmol/L硫酸镁、0.8-1.2μmol上游内引物、0.8-1.2μmol/L下游内引物、0.2-0.3μmol/L上游外引物、0.2-0.3μmol/L下游外引物和1-1.5mol/L甜菜碱;其中10×Thermopol反应缓冲液含有200mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mmol/L氯化钾、100mmol/L硫酸铵、20mmol/L硫酸镁和1%曲拉通X-100;其中上游内引物;5-TTACGTCACCAACGACACGGG-ACGTATTGGGCAATGACTGG-3、下游内引物;5-CGGTAAATACCATCCCCACGGC-TAACGCAGCGAGAATGGC-3、上游外引物:5-GTCGCGTACTTTACGCCAT-3、下游外引物:5-ACCCTGACCATCCACCAG-3;(2)UNG酶:1U/μL;(3)Bst DNA聚合酶:8U/μL;(4)显色剂:为10%的荧光染料SYBR GREEN I或者DNAGreen。 |
地址 |
266002山东省青岛市瞿塘峡路70号 |