发明名称 一种兔抗人MK单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用
摘要 本发明涉及一种兔抗人MK单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用。所述兔抗人MK单克隆抗体由以下方法获得:以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞,与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合,选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞,进行亚克隆并扩大培养,得到所述兔抗人MK单克隆抗体。本发明以GST-MK融合蛋白作为抗原,既增加抗原的免疫原性,方便筛选。用兔骨髓瘤样240E细胞应用杂交瘤技术进行制备,融合蛋白筛选阳性克隆,选择与GST-MK蛋白反应而与GST不反应的特异性杂交瘤细胞株为阳性细胞株;在western bloting鉴定,得到特异性抗MK的单克隆抗体,该单克隆抗体可与人MK特异性结合,可应用于人血清中MK检测。
申请公布号 CN101255194A 申请公布日期 2008.09.03
申请号 CN200710301302.2 申请日期 2007.12.26
申请人 湖州市中心医院 发明人 姚行;戴利成;钱福初
分类号 C07K16/24(2006.01);C12N5/16(2006.01) 主分类号 C07K16/24(2006.01)
代理机构 浙江杭州金通专利事务所有限公司 代理人 徐关寿
主权项 1、一种兔抗人MK单克隆抗体,由以下方法获得:以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞,与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合,选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞,进行亚克隆并扩大培养,得到所述兔抗人MK单克隆抗体。
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