应用流式细胞术中的散射光及自发荧光参数进行粘孢子虫分类的方法

摘要

本发明公开了一种应用流式细胞术中的散射光及自发荧光参数进行粘孢子虫分类的方法，步骤如下：材料的收集、仪器校正、样品的制备、上机检测、流式细胞学数据分析；其中数据分析是先进行分别上样获取的散点图与直方图的比较分析，然后再进行与混合上样获取的散点图与直方图分别进行对比研究，并通过相关数据及图形的比较研究，得出结果。本发明检测方便、快捷。如果对每种粘孢子虫的相关物理参数(如散射光及自发荧光)进行测定、分析、存档，(如在已测定完足够虫种的情况下)然后通过对多种待测粘孢子进行相同的测定，并进行对比分析，即可比较容易地判断出为具体的某一种粘孢子虫。

主权项

1、一种应用流式细胞术中的散射光及自发荧光参数进行粘孢子虫分类的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1：样品的制备，收集进行分类的粘孢子虫，将收集的粘孢子虫的孢囊壁戳破，提取流出孢子；然后将孢子经过滤膜过滤去杂屑；超声波振碎5～10min，6000～12000rpm/min离心5～10min，加PBS悬浮，去上清，以上过程3～5次重复，最后一次离心后加PBS悬浮，待其单个孢子完全分散开后调整其浓度达1×105～1×106/ml；步骤2：将制备好的粘孢子虫的单细胞悬液进行上机检测，CellQuest获取数据，且数据分别以散点图与直方图显示；步骤3：数据分析和比较。将各获取的粘孢子虫的单细胞悬液的散点图和直方图分别进行比较研究，得出结果。