发明名称 黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法
摘要 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。
申请公布号 CN101241128A 申请公布日期 2008.08.13
申请号 CN200810034739.9 申请日期 2008.03.18
申请人 上海大学 发明人 陈宇光;戴小峰;田汉莉;沈彦萍;顾鸣;黎双华
分类号 G01N33/531(2006.01);G01N33/558(2006.01) 主分类号 G01N33/531(2006.01)
代理机构 上海上大专利事务所 代理人 何文欣
主权项 1.一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法,其特征在于该方法的具体步骤为:a..酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;b.醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;c.抗体与固相基质的偶联:将步骤a所得酰肼化抗体和步骤b所得醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;d.装柱。
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