发明名称 |
农杆菌介导的花椒转基因方法 |
摘要 |
本发明公开了一种农杆菌介导的花椒转基因方法,包括下列步骤:(1)将带腋芽幼嫩茎段及茎尖接种于诱导培养基中,以萌发20天腋芽的叶柄及茎段作为浸染外植体;(2)将农杆菌单菌落,用牙签挑取,加入到YEP液体培养基中培养震荡培养,直到OD值达到0.4-0.7,离心收集菌体,用WPM重悬培养基重悬制得农杆菌菌液;(3)将叶柄及茎段切成0.5cm左右的外植体,接种到诱导培养基于黑暗中预培养,培养时间48-72h,投入步骤b农杆菌菌液中,使外植体与农杆菌充分接触,取出外植体,转入共培养基上培养48-72h,然后转入筛选培养基中诱导芽再生,最后将材料接种到生根培养基中诱导生根。本发明能培育抗病虫、抗低温、抗干旱,高精油含量、高药用价值及无刺的转基因花椒。 |
申请公布号 |
CN101195832A |
申请公布日期 |
2008.06.11 |
申请号 |
CN200710078066.2 |
申请日期 |
2007.12.25 |
申请人 |
贵州大学 |
发明人 |
赵德刚;曾晓芳;李岩 |
分类号 |
C12N15/82(2006.01);A01H4/00(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/82(2006.01) |
代理机构 |
贵阳东圣专利商标事务有限公司 |
代理人 |
袁庆云 |
主权项 |
1.一种农杆菌介导的花椒转基因方法,包括下列步骤:(1)将带腋芽幼嫩茎段及茎尖接种于诱导培养基中,以萌发20天腋芽的叶柄及茎段作为浸染外植体;(2)将农杆菌单菌落,用牙签挑取,加入到YEP液体培养基中培养震荡培养,直到OD值达到0.4-0.7,离心收集菌体,用WPM重悬培养基重悬制得农杆菌菌液;(3)将叶柄及茎段切成0.5cm左右的外植体,接种到诱导培养基于黑暗中预培养,培养时间48-72h,投入步骤b农杆菌菌液中,使外植体与农杆菌充分接触,取出外植体,转入共培养基上培养48-72h,然后转入筛选培养基中诱导芽再生,最后将材料接种到生根培养基中诱导生根。 |
地址 |
550025贵州省贵阳市花溪区贵州大学(北区)科技处 |