一种从动物肝脏中提取酯酶的方法

摘要

本发明涉及一种从动物肝脏中提取酯酶的方法。首先将动物肝脏搅碎、匀浆、经过脱脂处理后制成肝粉，然后将其用氨水溶液抽提，酸、碱处理后盐析，制成酶粗品，然后经过阴、阳离子交换层析柱、凝胶层析柱纯化，最后超滤、浓缩、冻干，制成冻干粉。本发明提取工艺简单、设备简单、原料来源丰富、生产成本低、环境污染小，而且产品稳定、收率高、酶活力高，有益于大批量生产。

主权项

1.一种从动物肝脏中提取酯酶的方法，其过程依次包括如下步骤：1).脱脂肝粉制备：将新鲜动物肝脏切成碎块、搅碎、充分匀浆，然后加入丙酮后离心，收集沉淀，干燥；然后将肝粉颗粒研磨、过筛、收集细粉，加入三氯甲烷充分搅拌，抽滤，重复两次，收集滤饼、干燥；2).酶粗品制备：将肝粉用氨水溶液恒温抽提两次，合并滤液；将所得水溶液用乙酸溶液酸化、离心，收集上清液；然后调PH至中性，用硫酸铵初次盐析、离心、收集上清，再次盐析、收集沉淀，得酯酶粗品；3).精制：将粗品用磷酸盐缓冲液溶解后，经过阴、阳离子交换层析柱纯化，接收主峰，浓缩，然后再经过凝胶层析柱分离，接收主产物峰；4)超滤、浓缩、冻干：将收集的溶液用微孔滤膜预过滤后，超滤、浓缩、冻干。