重组人源酪蛋白巨肽制备方法

摘要

本发明采用DNA重组技术，根据大肠杆菌偏爰密码，设计、合成了人源酪蛋白巨肽(hCMP)编码基因并由BamH I和Sac I定向克隆进pET28a(+)。筛出阳性克隆之后，挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。当菌体密度OD₆₀₀在1.0左右，加入诱导剂IPTG达0.5mM/L，30℃。诱导8小时目标蛋白合成达到高峰，且多数定位于细胞周质和细胞质中，包含体内仅有少量。粗蛋白采用Ni－螯合亲和层析进行初分，DEAE－sepherose离子交换柱纯化，经重组肠激酶酶切后获得rhCMP。由于它富含支链氨基酸和必需氨基酸，适合作为各种肝病、肝癌以及老弱体虚者的营养液以及用作运动员等的口服液。

主权项

1.一种重组人源酪蛋白巨肽的制备方法，其特征在于，采用基因工程菌发酵法生产，而不是从天然存在的酪蛋白中酶切制取。