发明名称 |
一种A型口蹄疫亚单位疫苗的制备方法 |
摘要 |
本发明涉及一种制备用于预防因A型口蹄疫病毒引起的动物疾病的亚单位疫苗,以及这种方法制备的疫苗。本发明疫苗的制备方法是:设计引物与模板并用聚合酶链式反应分别制备出口蹄疫病毒的P12X基因和3C基因,再将所得到的P12X基因和3C基因插入到逆转录病毒表达载体多克隆位点,构建重组逆转录病毒表达载体,再将重组逆转录病毒表达载体和含VSV-G基因的质粒载体通过脂质体共转染至包装细胞GP2-293,在包装细胞内形成假病毒,再将假病毒基因组中含有的P12X3C基因整合到幼仓鼠肾细胞的基因组中并表达结构蛋白和蛋白酶3C。 |
申请公布号 |
CN101130780A |
申请公布日期 |
2008.02.27 |
申请号 |
CN200710141553.9 |
申请日期 |
2007.08.01 |
申请人 |
中国农业科学院兰州兽医研究所 |
发明人 |
刘艳红;刘湘涛;刘俊林;李炯;安芳兰;田宏;尚佑军 |
分类号 |
C12N15/66(2006.01);C12N15/42(2006.01);C12N15/85(2006.01);C07K14/09(2006.01);A61K39/135(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/66(2006.01) |
代理机构 |
兰州振华专利代理有限责任公司 |
代理人 |
张晋 |
主权项 |
1.一种A型口蹄疫亚单位疫苗的制备方法,其特征是设计引物后用聚合酶链式反应分别制备出口蹄疫病毒的结构蛋白P1、非结构蛋白2A和部分2B(命名为P12X)以及3C基因,再将所得到的P12X基因和3C基因插入到逆转录病毒表达载体多克隆位点,构建成含有多基因的重组逆转录病毒表达载体,将构建正确的重组逆转录病毒表达载体和含VSV-G基因的质粒载体通过脂质体共转染至包装细胞GP2-293,在包装细胞内形成假病毒,再用假病毒感染幼仓鼠肾细胞(BHK-21),将假病毒基因组中含有的P12X3C基因整合到幼仓鼠肾细胞的基因组中并表达口蹄疫空衣壳蛋白。 |
地址 |
730046甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号 |