海洋微生物来源的杀虫化合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种海洋微生物来源的杀虫化合物及其制备方法和应用。该化合物是从海洋放线菌南海8号的菌体中提取分离而得到。该杀虫化合物对甜菜夜蛾表现出较高的胃毒和拒食活性，同时也有较好的触杀活性。本发明杀虫化合物对甜菜夜蛾表现出较高的生物活性；并比较系统地研究了对甜菜夜蛾生物活性，为生产上应用提供了理论依据。本发明提取过程简单，为工业提取奠定了基础。

主权项

1.一种海洋微生物来源的杀虫化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)海洋放线菌南海8号的种子培养：将改良的高氏一号培养基装入茄子瓶中，121℃高压灭菌30mins，取出摆斜面，冷却凝固后在无菌条件下接入菌种，在28℃下培养4～6d；(2)海洋放线菌南海8号的的发酵培养：将斜面中培养好的菌株制成浓度为1×107个/ml的孢子悬浮液，取0.2ml孢子悬浮液接入50ml发酵培养基中，30℃ 160转/分钟连续培养96小时后，将培养好的发酵液过滤，收集菌丝体；(3)在室温下将海洋放线菌南海8号的菌丝体用70％乙醇按照W菌丝体∶V70％乙醇 为1∶2的比例分别浸提两次，所得菌丝浸取液浓缩至固体浸膏；(4)将固体浸膏用乙酸乙酯按照W浸膏∶V乙酸乙脂为1∶2比例分别萃取两次，将萃取得到溶液浓缩后得到萃取物；(5)对萃取物进行真空液相层析，通过甲醇溶剂体系进行洗脱；(6)将真空液相层析后得到的组分进行硅胶柱层析，通过V甲醇∶V三氯甲烷 为1∶4进行洗脱，纯化得到淡黄色片状结晶，即为杀虫化合物；所述步骤(1)中菌种为海洋放线菌南海8号即Strptomyces sp.GDPPRANH8，在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏时间为2006年9月5日，保藏号为CCTCC No：M 206087；所述改良的高氏一号培养基的组成为：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl0.5g，海水精3g，K2HPO4·3H2O 0.66g，FeSO4·7H2O 0.02g，MgSO4·7H2O1.03g，琼脂16g，PH：7.2～7.4，水1000ml；所述的发酵培养基组成为：大豆蛋白粉30g，蔗糖40g，海水精3g，CaCO3 2g，KNO3 2g，K2HPO4·3H2O 0.66g，FeSO4·7H2O 0.02g，MgSO4·7H2O1.03g，PH：7.2～7.4，水1000ml；121℃高压灭菌半小时。