发明名称 |
一种高效转糖基β-半乳糖苷酶基因 |
摘要 |
本发明公开了一种高效转糖基β-半乳糖苷酶基因,所述基因由阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)B5 CGMCC No.1401基因组DNA借助PCR扩增获得。该基因核苷酸序列全长3090碱基,编码1029个氨基酸。由该基因表达的重组酶特征为:酶为四亚基蛋白,聚合体分子量为391kD,单亚基分子量为97.8kD;酶对乳糖的K<SUB>m</SUB>值为0.32mmol/L,V<SUB>max</SUB>为210.70μmol/(L·min);酶对邻硝基苯酚-β-D-半乳糖苷的K<SUB>m</SUB>值接近于0;酶最适反应温度为35℃,最适反应pH为6.5~9.5;酶在室温能稳定保存至少2个月;酶以乳糖为底物转糖基生成的低聚半乳糖产率为55%;酶转糖基的受体底物特异性很广,可用以合成多种半乳糖苷化合物。酶基因的获得,可用于基因改造获得新的β-半乳糖苷合成酶,从根本上提高半乳糖苷化合物的合成效率。 |
申请公布号 |
CN100370029C |
申请公布日期 |
2008.02.20 |
申请号 |
CN200510044897.9 |
申请日期 |
2005.10.11 |
申请人 |
山东大学 |
发明人 |
肖敏;卢丽丽 |
分类号 |
C12N15/56(2006.01);C12N9/38(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12P19/14(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/56(2006.01) |
代理机构 |
济南圣达专利商标事务所 |
代理人 |
郑华清 |
主权项 |
1.一种转糖基β-半乳糖苷酶基因,具有如下特征:(1)具有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列,全长3090碱基;(2)该基因编码1029个氨基酸,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示核苷酸编码的氨基酸序列。 |
地址 |
250100山东省济南市山大南路27号 |