摘要 |
Procedimiento para la preparación secuencial de proteomas parciales a partir del proteoma total de una preparación celular, que se caracteriza por los siguientes pasos del procedimiento: a) preparación de una muestra que contiene una preparación celular; b) extracción de las proteínas citosólicas y de las proteínas de membrana/orgánulos de la muestra preparada en el paso a), quedando una preparación del núcleo celular; c) extracción de las proteínas del interior del núcleo celular de la preparación del núcleo celular obtenida en el paso b) mediante tratamiento con un tampón de extracción con un valor de pH entre 6, 5 y 8, que contiene al menos los componentes siguientes: - entre un 0, 1% y un 7% en masa de uno o varios detergentes no iónicos - entre un 0, 05% y un 3% en masa de uno o varios derivados de ácido cólico - una o varias sales del grupo de las sales de metales alcalinos y/o de amonio en una concentración total entre 75 y 500 mMol/l, obteniéndose un proteoma parcial enriquecido en proteínas del interior del núcleo celular, como proteínas de unión a ADN, proteínas no histónicas (por ejemplo grupos de alta movilidad y factores de trascripción), proteínas de unión a ARN y proteínas asociadas al esqueleto.
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