利用竹节参细胞培养和生物转化技术获得竹节参次生代谢产物的方法

摘要

本发明公开了属于植物细胞培养工程领域的一种利用竹节参细胞培养和生物转化技术获得竹节参次生代谢产物的方法。在改良的RW培养基中，加蔗糖、植物生长激素和植物细胞分裂素，再加入凝固剂经高温消毒，经冷却后制成诱导培养基；将竹节参的外植体在无菌条件下接种在诱导培养基中诱导形成愈伤组织；经扩增，获得大量细胞；在合成培养基中将大量扩增的愈伤组织细胞接种到合成培养液中，用溶剂萃取收获细胞获得竹节参皂苷粗提物及其副产物，再经过纯化获得竹节参皂苷，竹节参多糖以及其它化合物。利用本发明所述方法可以生产出竹节参的次生代谢产物，生产成本低，培养周期短，不受自然环境限制，可以实现周年生产。

主权项

1.一种利用竹节参细胞培养和生物转化技术生产竹节参次生代谢产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)在RW培养基中，按每升培养液添加蔗糖或葡萄糖20～50g，植物生长激素0.1～5mg和植物细胞分裂素0.1～5mg，将pH值调整到5.5～7.0，再添加1.8～8g/L凝固剂，在115～120℃，0.1MPa压力下消毒15分钟后，经冷却制成斜面诱导培养基；2)将竹节参的外植体经表面杀菌，在无菌条件下接种在诱导培养基中，25℃避光条件下培养1～2个月诱导形成愈伤组织；3)将竹节参愈伤组织接种在生长培养基上扩增，25℃避光条件下培养1个月获得大量细胞；4)在RW培养基中添加组合前体40～150mg和组合诱导子80μg～60mg，制成合成培养基；5)将大量扩增的愈伤组织细胞接种到合成培养液中，在25℃避光条件下振荡培养1周后收获细胞；6)用溶剂萃取收获细胞获得竹节参皂苷粗提物及其副产物，再经过纯化获得竹节参皂苷，竹节参多糖以及其它化合物。