一种制备纯化柚苷酶的方法及其酶制剂的应用

摘要

本发明公开一种制备纯化柚苷酶的方法及其酶制剂的应用，其制备方法按如下步骤操作：1)采用常规微生物接种方法接种：试管斜面培养，采用察式固体培养基：接种，将上述生长的菌株移接到产孢固体培养基中，25－32℃，培养3－5天，至孢子产生；步骤1)以真菌为菌种，步骤2)将所述菌株孢子按0.5－10％接种量投加到固体培养基中，控制碳氮比例在2－5∶1－3.5范围内，保持湿度为30－70％，温度25－35℃，自然pH值，柚苷酶的产生时间为40－90小时；提取，加料重的2－5倍纯化水，过滤离心的清液；纯化：采取盐析法和有机溶剂沉淀法结合的方法，提纯柚苷酶。盐析，硫酸铵饱和度为30－80％，有机溶剂沉淀，有机溶剂浓度为40－90％；柚苷酶产品作为柑橘类产品的脱苦剂和天然药物中黄酮类化合物的苷元转化剂，具有广泛的用途。本发明产柚苷酶的活力高，能广泛的应用于实际生产。

主权项

1、一种制备纯化柚苷酶的方法，其特征在于：按如下步骤操作：1)采用常规微生物接种方法接种：试管斜面培养，采用察式固体培养基；接种：将上述生长的菌株移接到产孢固体培养基中，25-35℃，培养3-5天，至孢子产生；步骤1)以真菌为菌种；2)将所述菌株孢子按0.5-10％接种量投加到固体培养基中，控制碳氮比例在2-5∶1-3.5范围内，保持湿度为30-70％，温度25-35℃，自然PH值，柚苷酶的产生时间为40-90小时；提取，加料重的2-5倍纯化水，过滤离心的清液；纯化：采取盐析法和有机溶剂沉淀法结合的方法，提纯柚苷酶，盐析，硫酸铵饱和度为30-80％，有机溶剂沉淀，有机溶剂浓度为40-90％。