一种多肽随机文库及其构建方法和从该文库中筛选细胞穿透多肽的方法

摘要

本发明一种多肽随机文库，涉及生物医药领域。本发明多肽随机文库中任何一个融合蛋白组成为：用于纯化融合蛋白的标签、示踪蛋白和随机多肽，其中示踪蛋白连接在用于纯化融合蛋白的标签的羧基末端，随机多肽连接至示踪蛋白的羧基末端。本发明还提供了多肽随机文库的构建方法及从该文库中筛选细胞穿透多肽的方法。本发明多肽随机文库容量达到1×10⁶以上。本发明以增强型的绿色荧光蛋白为示踪，筛选方法简单，可以进行高通量的筛选。本发明随机文库筛选得到的细胞穿透多肽，具有广泛用途。

主权项

1、一种从多肽随机文库中筛选细胞穿透多肽的方法，该方法含有以下步骤：a)将多肽随机文库进行诱导表达并利用组氨酸标签或谷胱甘肽巯基转移酶标签纯化得到纯化蛋白；b)将纯化蛋白加入培养细胞进行孵育；c)将步骤b孵育的结果在荧光显微镜下观察，筛选出其中有绿色荧光在细胞中蓄积的多肽即为细胞穿透多肽；其中所述的多肽随机文库中含有结构为纯化标签-示踪蛋白-随机多肽的融合蛋白。